熒光分光光度計(jì)注意事項(xiàng)

a. 請(qǐng)注意愛(ài)護(hù)液體比色皿，特別是測(cè)試有機(jī)樣品的同學(xué)請(qǐng)?jiān)跍y(cè)量完畢后用有機(jī)溶劑清洗，干燥后再放入盒子中，否則會(huì)造成比色皿表面嚴(yán)重污染，影響透光度。

b. 固體樣品池僅剩一個(gè)，測(cè)試完畢請(qǐng)物歸原處。

測(cè)試完畢請(qǐng)注意登記，關(guān)閉儀器。

分子吸收、熒光、磷光輻射躍遷

躍遷——去活化過(guò)程

處于激發(fā)態(tài)分子不穩(wěn)定，通過(guò)輻射或非輻射躍遷等去活化過(guò)程返回至基態(tài) 。這些過(guò)程包括：

1)振動(dòng)弛豫

在液相或壓力足夠高的氣相中，處于激發(fā)態(tài)的分子因碰撞將能量以熱的形式傳遞給周?chē)姆肿?，從而從高振?dòng)能層失活至低振動(dòng)能層的過(guò)程，稱(chēng)為振動(dòng)弛豫。

2)內(nèi)轉(zhuǎn)換

對(duì)于具有相同多重度的分子，若較高電子能級(jí)的低振動(dòng)能層與較低電子能級(jí)的高振動(dòng)能層相重疊時(shí)，則電子可在重疊的能層之間通過(guò)振動(dòng)耦合產(chǎn)生躍遷。

定性分析

任何熒光都具有兩種特征光譜：激發(fā)光譜與發(fā)射光譜。它們是熒光定性分析的基礎(chǔ)。

1)激發(fā)光譜

改變激發(fā)波長(zhǎng)，測(cè)量在zui強(qiáng)熒光發(fā)射波長(zhǎng)處的強(qiáng)度變化，以激發(fā)波長(zhǎng)對(duì)熒光強(qiáng)度作圖可得到激發(fā)光譜。

激發(fā)光譜形狀與吸收光譜形狀*相似，經(jīng)校正后二者*相同!這是因?yàn)榉肿游展饽艿倪^(guò)程就是分子的激發(fā)過(guò)程。

激發(fā)光譜可用于鑒別熒光物質(zhì);在定量時(shí)，用于選擇zui適宜的激發(fā)波長(zhǎng)。

2)發(fā)射光譜

發(fā)射光譜即熒光光譜。一定波長(zhǎng)和強(qiáng)度的激發(fā)波長(zhǎng)輻照熒光物質(zhì)，產(chǎn)生不同波長(zhǎng)的強(qiáng)度的熒光，以熒光強(qiáng)度對(duì)其波長(zhǎng)作圖可得熒光發(fā)射光譜。

由于不同物質(zhì)具不同的特征發(fā)射峰，因而使用熒光發(fā)射光譜可用于鑒別熒光物質(zhì)。

使用熒光光度計(jì)檢測(cè)熒光信號(hào)時(shí)，比色皿使用完畢要用有機(jī)溶劑清洗干凈，防止比色皿污染導(dǎo)致測(cè)量值不準(zhǔn)確，此外實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，要將清洗好的比色皿干燥后再保存。